传代后观察细胞生长状态
更新日期:2022-01-14     浏览次数:4
核心提示:1.2.2耐药细胞的诱导 采用逐渐提高药物浓度、间歇诱导的方法建立人MDS耐药株。由于初期加入药物细胞极易死亡,因此第一次加药浓度极低,为0.1mol/L,

1.2.2耐药细胞的诱导  

采用逐渐提高药物浓度、间歇诱导的方法建立人MDS耐药株。由于初期加入药物细胞极易死亡,因此第一次加药浓度极低,为0.1μmol/L,48h后除去旧的培养基,更换具有相同浓度的阿扎胞苷的新的培养基,待细胞耐受并稳定生长后,对细胞进行1:2的传代。传代后观察细胞生长状态,取处于对数生长期细胞一部分进行冻存,一部分继续增加药物的浓度,每次增加为0.1μmol/L,经过几个周期后细胞最终能够耐受去甲基化药物AZA 2μmol/L,并在2μmol/L浓度下维持培养半个月,成功建立MDS耐药细胞株。